Nature.com сайтаар зочилсонд баярлалаа.Та хязгаарлагдмал CSS дэмжлэгтэй хөтчийн хувилбарыг ашиглаж байна.Хамгийн сайн ашиглахын тулд бид танд шинэчилсэн хөтөч ашиглахыг зөвлөж байна (эсвэл Internet Explorer-д нийцтэй байдлын горимыг идэвхгүй болгох).Нэмж дурдахад, байнгын дэмжлэгийг хангахын тулд бид сайтыг хэв маяг, JavaScript-гүй харуулж байна.
Гурван слайдаас бүрдсэн тойргийг нэг дор харуулна.Өмнөх болон Дараагийн товчийг ашиглан гурван слайдыг нэг дор гүйлгэх, эсвэл төгсгөлд байрлах гулсагч товчлуурыг ашиглан гурван слайдыг нэг дор гүйлгэж болно.
Конфокаль лазер дурангийн шинжилгээ нь бодит цагийн оптик биопсийн шинэ арга юм.Гистологийн чанарын флюресцент зургийг хөндий эрхтнүүдийн хучуур эдээс шууд авах боломжтой.Одоогоор сканнердах ажиллагааг эмнэлзүйн практикт түгээмэл хэрэглэгддэг, фокусыг хянах уян хатан чанар хязгаарлагдмал датчик дээр суурилсан багажаар хийж байна.Бид дурангийн алсын төгсгөлд суурилуулсан параметрийн резонансын сканнерыг өндөр хурдтай хажуугийн хазайлтыг гүйцэтгэхийн тулд ашиглаж байгааг харуулж байна.Гэрлийн замыг өнхрүүлэхийн тулд тусгалын голд нүх сийлсэн байна.Энэхүү загвар нь багажийн хэмжээг 2.4 мм диаметртэй, 10 мм урт болгон багасгаж, стандарт эмнэлгийн дурангийн ажлын сувгаар урагш дамжуулах боломжийг олгодог.Компакт линз нь хажуугийн болон тэнхлэгийн нарийвчлалыг тус тусад нь 1.1 ба 13.6 μm-ээр хангадаг.20 Гц хүртэлх фрэймийн хурдаар 0 μм-ийн ажлын зай, 250 µm × 250 µm-ийн харах талбарт хүрдэг.488 нм-ийн өдөөлт нь FDA-аас зөвшөөрөгдсөн эд эсийн тодосгогч бодис болох флуоресцеиныг өдөөдөг.Эмнэлзүйн зөвшөөрөгдсөн ариутгалын аргуудыг ашиглан дурангийн дуранг 18 циклийн турш ямар ч гэмтэлгүйгээр дахин боловсруулсан.Тогтмол колоноскопи хийх үед бүдүүн гэдэсний хэвийн салст бүрхэвч, гуурсан хоолойн аденома, гиперпластик полип, шархлаат колит, Кроны колит зэргээс флюресцент зургийг авсан.Колоноцит, гоблет эс, үрэвслийн эс зэрэг нэг эсийг тодорхойлж болно.Салст бүрхэвчийн шинж чанарууд болох криптийн бүтэц, криптийн хөндий, ламина проприа зэргийг ялгаж салгаж болно.Энэхүү багажийг ердийн дурангийн шинжилгээнд нэмэлт болгон ашиглаж болно.
Конфокаль лазер дурангийн шинжилгээ нь ердийн дурангийн нэмэлт болгон эмнэлзүйн хэрэглээнд зориулан хөгжүүлж буй дүрслэлийн шинэ арга юм1,2,3.Эдгээр уян хатан, шилэн кабелиар холбогдсон багажийг бүдүүн гэдэс гэх мэт хөндий эрхтнүүдийг хамарсан хучуур эдийн эсийн өвчнийг илрүүлэхэд ашиглаж болно.Энэхүү нимгэн эдийн давхарга нь бодисын солилцооны өндөр идэвхтэй бөгөөд хорт хавдар, халдвар, үрэвсэл зэрэг олон өвчний эх үүсвэр болдог.Дурангийн шинжилгээ нь эсийн эсийн нарийвчлалыг сайжруулж, бодит цаг хугацаанд, гистологийн чанартай ойролцоох in vivo дүрсийг үзүүлж, эмч нарт эмнэлзүйн шийдвэр гаргахад тусалдаг.Бие махбодийн эд эсийн биопси нь цус алдах, цоорох эрсдэлтэй байдаг.Хэт олон эсвэл хэт цөөн биопсийн сорьцыг ихэвчлэн цуглуулдаг.Устгасан дээж бүр нь мэс заслын зардлыг нэмэгдүүлдэг.Дээжийг эмгэг судлаачаар үнэлэхэд хэдэн өдөр шаардагдана.Эмгэг судлалын үр дүнг хүлээж буй өдрүүдэд өвчтөнүүд ихэвчлэн сэтгэлийн түгшүүртэй байдаг.Үүний эсрэгээр, MRI, CT, PET, SPECT, болон хэт авиан зэрэг эмнэлзүйн дүрслэлийн бусад аргууд нь эпителийн үйл явцыг бодит цаг хугацаанд, эсийн доорх нягтралтайгаар нүдээр харуулахад шаардагдах орон зайн нарийвчлал, цаг хугацааны хурд дутагдалтай байдаг.
Одоогоор эмнэлгүүдэд "оптик биопси" хийхэд датчик дээр суурилсан багажийг (Cellvizio) ашигладаг.Энэхүү загвар нь флюресцент дүрсийг цуглуулж, дамжуулдаг орон зайн уялдаатай шилэн кабелийн багц4 дээр суурилдаг.Нэг ширхэг шилэн цөм нь эсийн доторх нягтралд зориулж төвлөрсөн гэрлийг орон зайд шүүх "нүх" болж ажилладаг.Том хэмжээтэй гальванометр ашиглан сканнердах ажлыг проксимал байдлаар гүйцэтгэдэг.Энэ заалт нь фокусыг хянах хэрэгслийн чадварыг хязгаарладаг.Эпителийн хорт хавдрын эрт үе шатыг зөв тогтоохын тулд эд эсийн гадаргуугийн доор харагдах байдлыг үнэлэх, зохих эмчилгээг тодорхойлох шаардлагатай.Fluorescein, FDA-аас зөвшөөрөгдсөн тодосгогч бодисыг судсаар тарьж, хучуур эдийн бүтцийн онцлогийг тодруулдаг. Эдгээр эндомикроскопууд нь 2.4 мм-ээс бага диаметртэй бөгөөд стандарт эмнэлгийн дурангийн биопсийн сувгаар амархан дамжих боломжтой. Эдгээр эндомикроскопууд нь 2.4 мм-ээс бага диаметртэй бөгөөд стандарт эмнэлгийн дурангийн биопсийн сувгаар амархан дамжих боломжтой. Эти эндомикроскопи imeyut размеры <2,4 мм в диаметртэй ба легко проведены через биопсийн суваг стандартных медицинских эндоскопов байж болно. Эдгээр эндомикроскопууд нь 2.4 мм-ээс бага диаметртэй бөгөөд стандарт эмнэлгийн дурангийн биопсийн сувгаар амархан дамждаг.Эдгээр бороскопууд нь 2.4 мм-ээс бага диаметртэй бөгөөд стандарт эмнэлгийн бороскопуудын биопсийн сувгаар амархан дамждаг.Энэхүү уян хатан байдал нь өргөн хүрээний эмнэлзүйн хэрэглээг зөвшөөрдөг бөгөөд дурангийн үйлдвэрлэгчээс хараат бус байдаг.Энэхүү дүрслэлийн төхөөрөмжийг ашиглан улаан хоолой, ходоод, бүдүүн гэдэс, амны хөндийн хорт хавдрыг эрт илрүүлэх зэрэг олон эмнэлзүйн судалгаа хийсэн.Дүрслэлийн протоколуудыг боловсруулж, процедурын аюулгүй байдлыг тогтоосон.
Микроэлектромеханик систем (MEMS) нь дурангийн алсын төгсгөлд ашигладаг жижиг сканнерын механизмуудыг зохион бүтээх, үйлдвэрлэх хүчирхэг технологи юм.Энэ байрлал (проксималтай харьцуулахад) нь фокусын байрлалыг удирдахад илүү уян хатан байх боломжийг олгодог5,6.Хажуугийн хазайлтаас гадна дистал механизм нь тэнхлэгийн сканнер, объективийн дараах сканнер, санамсаргүй хандалтын сканнеруудыг хийх боломжтой.Эдгээр чадварууд нь босоо хөндлөн огтлолын дүрслэл7, том харааны талбар (FOV)8 гажиггүй скан хийх, хэрэглэгчийн тодорхойлсон дэд бүсүүдийн гүйцэтгэлийг сайжруулах зэрэг илүү цогц хучуур эдийн эсийн байцаалтыг идэвхжүүлдэг.MEMS нь төхөөрөмжийн хамгийн төгсгөлд байгаа хязгаарлагдмал зай бүхий сканнерын хөдөлгүүрийг савлах ноцтой асуудлыг шийддэг.Их хэмжээний гальванометртэй харьцуулахад MEMS нь жижиг хэмжээтэй, өндөр хурдтай, бага эрчим хүч зарцуулдаг өндөр гүйцэтгэлтэй байдаг.Энгийн үйлдвэрлэлийн процессыг бага зардлаар их хэмжээгээр үйлдвэрлэх боломжтой.MEMS-ийн олон загварыг өмнө нь мэдээлсэн10,11,12.Эмнэлгийн дурангийн ажлын сувгаар дамжуулан бодит цагийн in vivo дүрслэлийг эмнэлзүйн өргөнөөр ашиглах боломжийг олгохын тулд аль ч технологи хангалттай хөгжөөгүй байна.Энд бид ердийн эмнэлзүйн дурангийн үед хүний ​​дүрсийг in vivo авах зорилгоор дурангийн алслагдсан төгсгөлд MEMS сканнер ашиглахыг харуулахыг зорьж байна.
Ижил төстэй гистологийн шинж чанар бүхий бодит цагийн in vivo флюресцент зургийг цуглуулахын тулд алслагдсан төгсгөлд MEMS сканнер ашиглан шилэн кабелийн багажийг бүтээсэн.Нэг горимт утас (SMF) нь уян хатан полимер хоолойд бэхлэгдсэн бөгөөд λex = 488 нм-д өдөөгддөг.Энэхүү тохиргоо нь алсын үзүүрийн уртыг богиносгож, стандарт эмнэлгийн дурангийн ажлын сувгаар урагш дамжуулах боломжийг олгодог.Оптикийг голлуулахын тулд үзүүрийг ашиглана уу.Эдгээр линз нь тоон диафрагм (NA) = 0.41, ажиллах зай = 0 μm13 байхаар бараг дифракцийн тэнхлэгийн нарийвчлалд хүрэх зорилготой юм.Нарийвчилсан жийргэвчийг оптикийг нарийн тохируулахын тулд хийдэг 14. Сканнер нь 2.4 мм диаметртэй, 10 мм урттай хатуу алсын үзүүртэй дурангаар савлагдсан (Зураг 1а).Эдгээр хэмжээсүүд нь дурангийн шинжилгээ хийх үед эмнэлзүйн практикт нэмэлт хэрэгсэл болгон ашиглах боломжийг олгодог (Зураг 1б).Эд эсэд туссан лазерын хамгийн их хүч нь 2 мВт байв.
Конфокаль лазер дурангийн (CLE) болон MEMS сканнер.(a) 2.4 мм диаметртэй, 10 мм урттай хатуу алсын үзүүртэй савласан багажийг харуулсан гэрэл зураг, (б) стандарт эмнэлгийн дурангийн (Olympus CF-HQ190L) ажлын сувгаар шууд дамждаг.(в) Өдөөлтийн цацраг дамждаг 50 мкм-ийн төв нүхтэй тусгагчийг харуулсан сканнерын урд талын зураг.Сканнер нь квадрат самнах хөтчүүдийн багцаар удирддаг гимбал дээр суурилагдсан.Төхөөрөмжийн резонансын давтамжийг мушгих пүршний хэмжээгээр тодорхойлно.(d) Хөтөч болон тэжээлийн дохиог холбох цэгүүдийг хангадаг электродын зангуунд холбогдсон утас бүхий суурин дээр суурилуулсан сканнерыг харуулсан сканнерын хажуугийн харагдах байдал.
Сканнердах механизм нь Lissajous загвараар цацрагийг хажуу тийш (XY хавтгай) хазайлгахын тулд самнаар удирддаг квадратурын иж бүрдэлээр удирддаг гимбал суурилуулсан тусгалаас бүрдэнэ (Зураг 1c).Өдөөлтийн туяа дамжсан төвд 50 микрон диаметртэй нүхийг сийлсэн байна.Сканнер нь дизайны резонансын давтамжаар хөдөлдөг бөгөөд энэ нь мушгих пүршний хэмжээг өөрчлөх замаар тохируулж болно.Цахилгаан ба хяналтын дохиог холбох цэгүүдийг хангахын тулд төхөөрөмжийн захын хэсэгт электродын зангууг сийлсэн (Зураг 1d).
Дүрслэх системийг мэс заслын өрөөнд оруулах боломжтой зөөврийн тэргэнцэр дээр суурилуулсан.График хэрэглэгчийн интерфэйс нь эмч, сувилагч гэх мэт техникийн хамгийн бага мэдлэгтэй хэрэглэгчдэд туслах зорилготой юм.Сканнерын хөтчийн давтамж, цацрагийн хэлбэр, зургийн FOV-г гараар шалгана уу.
Дурангийн нийт урт нь ердийн эмнэлгийн дурангийн (1.68м) ажлын сувгаар багажийг бүрэн нэвтрүүлэхийн тулд ойролцоогоор 4м бөгөөд маневр хийх нэмэлт урттай.Дурангийн проксимал төгсгөлд SMF болон утаснууд нь үндсэн станцын шилэн кабелийн болон утастай портуудтай холбогч холбогчоор төгсдөг.Суурилуулалт нь лазер, шүүлтүүрийн төхөөрөмж, өндөр хүчдэлийн өсгөгч, фото үржүүлэгч илрүүлэгч (PMT) зэргийг агуулдаг.Өсгөгч нь сканнер руу цахилгаан болон хөтчийн дохио өгдөг.Оптик шүүлтүүрийн төхөөрөмж нь лазерын өдөөлтийг SMF-тэй холбож, флюресценцийг PMT-д дамжуулдаг.
Дурангуудыг эмнэлзүйн процедур бүрийн дараа STERRAD ариутгах процессыг ашиглан дахин боловсруулдаг бөгөөд 18 хүртэлх мөчлөгийг ямар ч гэмтэлгүйгээр тэсвэрлэх чадвартай.OPA уусмалын хувьд 10 гаруй удаа халдваргүйжүүлсний дараа гэмтлийн шинж тэмдэг илрээгүй.OPA-ийн үр дүн нь STERRAD-ийн үр дүнгээс илүү гарсан нь дурангийн дурангийн ашиглалтын хугацааг дахин ариутгахаас илүү өндөр түвшний халдваргүйжүүлэлтээр уртасгах боломжтойг харуулж байна.
Зургийн нягтралыг 0.1 μм диаметртэй флюресцент бөмбөлгүүдийг ашиглан цэгийн тархалтын функцээр тодорхойлсон.Хажуугийн болон тэнхлэгийн нарийвчлалын хувьд 1.1 ба 13.6 μм-ийн хагас хамгийн ихдээ (FWHM) бүрэн өргөнийг хэмжсэн (Зураг 2a, b).
Зургийн сонголтууд.Фокусын оптикийн хажуугийн (a) ба тэнхлэгийн (b) нарийвчлал нь 0.1 μм диаметртэй флюресцент микро бөмбөрцөг ашиглан хэмжсэн цэгийн тархалтын функцээр (PSF) тодорхойлогддог.Хагас дээд тал нь (FWHM) хэмжсэн бүрэн өргөн нь тус тус 1.1 ба 13.6 микрон байв.Оруулга: Хөндлөн (XY) болон тэнхлэгийн (XZ) чиглэлд нэг микро бөмбөрцгийн өргөтгөсөн дүр төрхийг харуулав.(в) Стандарт (USAF 1951) зорилтот туузаас (улаан зууван) авсан флюресцент дүрс нь 7-6 бүлгийг тодорхой шийдвэрлэх боломжтой болохыг харуулж байна.(г) 250 μм × 250 μм хэмжээтэй зургийн талбарыг харуулсан 10 μм диаметртэй тархсан флюресцент микро бөмбөрцгийн зураг.(a, b) дахь PSF-уудыг MATLAB R2019a (https://www.mathworks.com/) ашиглан бүтээсэн.(в, г) Флюресцент зургийг LabVIEW 2021 (https://www.ni.com/) ашиглан цуглуулсан.
Стандарт нарийвчлалтай линзээс авсан флюресцент зургууд нь 7-6-р бүлэгт баганын багцыг тодорхой ялгаж өгдөг бөгөөд энэ нь хажуугийн өндөр нарийвчлалыг хадгалдаг (Зураг 2c).250 μм × 250 μм-ийн харах талбарыг (FOV) нөмрөг дээр тархсан 10 микрон диаметртэй флюресцент бөмбөлгүүдийн зургуудаас тодорхойлсон (Зураг 2d).
Дуран, бүдүүн гэдэсний гүрвэлзэх хөдөлгөөн, өвчтөний амьсгалаас үүсэх хөдөлгөөнийг багасгах зорилгоор PMT-ийн өсөлтийг хянах, үе шатыг засах автоматжуулсан аргыг эмнэлзүйн дүрслэлийн системд нэвтрүүлсэн.Зургийг сэргээх, боловсруулах алгоритмуудыг өмнө нь тайлбарласан байдаг14,15.PMT-ийн өсөлтийг пропорциональ-интеграл (PI) хянагчаар удирдаж, эрчимжилтийн ханалтаас сэргийлдэг16.Систем нь хүрээ тус бүрийн пикселийн хамгийн их эрчмийг уншиж, пропорциональ болон интеграл хариуг тооцоолж, пикселийн эрчмийг зөвшөөрөгдсөн хязгаарт байлгахын тулд PMT-ийн өсөлтийн утгыг тодорхойлдог.
In vivo дүрслэлийн үед сканнерын хөдөлгөөн болон хяналтын дохионы хоорондох фазын үл нийцэл нь дүрсийг бүдгэрүүлэхэд хүргэдэг.Хүний биеийн доторх төхөөрөмжийн температурын өөрчлөлтөөс болж ийм нөлөө үүсч болно.Цагаан гэрлийн зургууд нь дурангийн энгийн бүдүүн гэдэсний салст бүрхэвчтэй in vivo харьцаж байгааг харуулсан (Зураг 3a).Бүдүүн гэдэсний хэвийн салст бүрхэвчийн түүхий зураг дээр буруу тохируулагдсан пикселүүдийн бүдэгрэлтийг харж болно (Зураг 3b).Зохих үе шат ба тодосгогчийг тохируулсны дараа салст бүрхүүлийн эсийн доорх шинж чанарыг ялгаж болно (Зураг 3c).Нэмэлт мэдээлэл авахын тулд түүхий конфокаль зураг болон боловсруулсан бодит цагийн зургийг Зураг S1-д, бодит цагийн болон дараах боловсруулалтад ашигласан дүрсийг сэргээн босгох параметрүүдийг Хүснэгт S1 ба Хүснэгт S2-д үзүүлэв.
Зураг боловсруулах.(a) Флюресцеин хэрэглэсний дараа in vivo флюресцент дүрсийг цуглуулахын тулд бүдүүн гэдэсний хэвийн (N) салст бүрхэвчтэй хавсарсан дуран (E) -ийг харуулсан өргөн өнцгийн дурангийн зураг.(б) Скан хийх явцад X ба Y тэнхлэгт тэнүүчлэх нь буруу тохируулагдсан пикселүүдийг бүдгэрүүлэхэд хүргэдэг.Үзүүлэн харуулах зорилгоор анхны зураг дээр том фазын шилжилтийг ашигладаг.(в) Боловсруулалтын дараах үе шатыг зассаны дараа салст бүрхүүлийн нарийн ширийн зүйлийг үнэлж болно, үүнд криптийн бүтэц (сум), давхаргын проприа (lp) -ээр хүрээлэгдсэн төв люмен (l) байна.Колоноцит (c), аяга эс (g), үрэвслийн эсүүд (сум) зэрэг нэг эсийг ялгаж болно.Нэмэлт видео 1-г үзнэ үү. (b, c) LabVIEW 2021 ашиглан боловсруулсан зургууд.
Уг багажийг эмнэлзүйн хувьд өргөн хэрэглэх боломжтойг харуулахын тулд бүдүүн гэдэсний хэд хэдэн өвчний үед конфокаль флюресценцийн зургийг in vivo байдлаар авсан.Өргөн өнцгийн дүрслэлийг эхлээд цагаан гэрлийн тусламжтайгаар салст бүрхэвчийг илрүүлэхийн тулд хийдэг.Дараа нь дурангийн дуранг бүдүүн дурангийн ажлын сувгаар урагшлуулж, салст бүрхэвчтэй холбоо тогтооно.
Гуурсан хоолойн аденома, гиперпластик полип зэрэг бүдүүн гэдэсний неоплазид өргөн хүрээний дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн шинжилгээ, гистологийн (H&E) зургийг үзүүлэв. Гуурсан хоолойн аденома, гиперпластик полип зэрэг бүдүүн гэдэсний неоплазид өргөн хүрээний дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн дурангийн шинжилгээ, гистологийн (H&E) зургийг үзүүлэв. Широкопольная эндоскопия, конфокальная эндомикроскопия ба гистологические (H&E) изображения показаны для неоплазии толстой кишки, включая тубулярную аденому ба гиперпластический полип. Гуурсан хоолойн аденома, гиперпластик полип зэрэг бүдүүн гэдэсний неоплазид бүдүүн гэдэсний дурангийн шинжилгээ, бүдүүн гэдэсний дурангийн дурангийн шинжилгээ, гистологийн (H&E) дүрслэлийг зааж өгдөг.显示结肠肿瘤（包括管状腺瘤和增生性息肉）的广角内窥镜检查、镜检查、共聚家组织学(H&E) 图像。共设计脚肠化(图像管状躰化和增生性息肉)的广角内刵霱录共共共光在共共共光在徨徒果学(H&E) зураг. Широкопольная эндоскопия, конфокальная микроэндоскопия ба гистологические (H&E) изображения, показывающие опухоли толстой кишки, включая тубулярные аденоми ба гиперпластик полипи. Өргөн хүрээний дурангийн дурангийн шинжилгээ, бүдүүн гэдэсний микро эндоскопи, бүдүүн гэдэсний хавдар, түүний дотор гуурсан хоолойн аденома, гиперпластик полип зэргийг харуулсан гистологийн (H&E) зураг.Хоолойн аденома нь криптийн хэвийн бүтэц алдагдах, аяганы эсийн хэмжээ багасах, криптийн хөндийгөөр гажилт, ламина проприа зузаарсан (Зураг 4a-c).Гиперпластик полипууд нь криптүүдийн од хэлбэрийн архитектур, цөөн тооны аяга эсүүд, ангархай хэлбэртэй люмен, жигд бус давхаргат криптүүдийг харуулсан (Зураг 4d-f).
In vivo салст бүрхүүлийн зузаан арьсны зураг. (ac) аденома, (df) гиперпластик полип, (gi) шархлаат колит, (jl) Crohn's колит зэрэгт зориулсан цагаан гэрлийн дуран, бүдүүн дурангийн дурангийн болон гистологийн (H&E) зургийг үзүүлэв. (ac) аденома, (df) гиперпластик полип, (gi) шархлаат колит, (jl) Crohn's колит зэрэгт зориулсан цагаан гэрлийн дуран, бүдүүн дурангийн дурангийн болон гистологийн (H&E) зургийг үзүүлэв. Типичные изображения эндоскопи в белом свете, конфокального эндомикроскоп ба гистологи (H&E) показаны для (ac) аденоми, (df) гиперпластического полипа, (gi) язвенного колита и (jl) колита Крона. (ac) аденома, (df) гиперпластик полип, (gi) шархлаат колит, (jl) Кроны колит зэрэгт цагаан гэрлийн дурангийн дуран, бүдүүн дурангийн дурангийн болон гистологийн (H&E) зургийг үзүүлэв.显示了(ac) 腺瘤、(df) 增生性息肉、(gi) 溃疡性结肠炎和(jl) 克罗恩结悠炎肠炎和检查、共聚焦内窥镜检查和组织学( H&E) 图像。 Энэ нь(ac) 躰真、(df) 增生性息肉、(gi) 苏盖性红肠炎和(jl)-г харуулж байна.共公司内肠肠炎性和电视学( H&E ) зураг. Представлены репрезентативные эндоскопия в белом свете, конфокальная эндоскопия ба гистология (ac) аденоми, (df) гиперпластик полипоза, (gi) язвенного колита ба (jl) колита Крона (H&E). (ac) аденома, (df) гиперпластик полипоз, (gi) шархлаат колит, (jl) Кроны колит (H&E)-ийн цагаан гэрлийн дуран, бүдүүн дурангийн болон гистологийг үзүүлэв.(Б) дурангийн дурангийн (E) ашиглан гуурсан хоолойн аденома (TA)-аас in vivo олж авсан гүдгэр зургийг харуулж байна.Энэхүү хорт хавдрын өмнөх гэмтэл нь ердийн криптийн бүтэц алдагдах (сум), криптийн хөндийн гажилт (l), крипт ламина проприа (lp) бөөгнөрөхийг харуулдаг.Колоноцитууд (c), аяга эсүүд (g), үрэвслийн эсүүд (сум) зэргийг мөн тодорхойлж болно.Smt.Нэмэлт видео 2. (д) нь in vivo гиперпластик полип (HP) -аас авсан гүдгэр зургийг харуулж байна.Энэхүү хоргүй гэмтэл нь од хэлбэрийн криптийн бүтэц (сум), ангархай хэлбэртэй крипт люмен (l), жигд бус хэлбэртэй ламина проприа (lp) харуулдаг.Колоноцитууд (c), хэд хэдэн аяга эсүүд (g) болон үрэвслийн эсүүд (сум) -ийг мөн тодорхойлж болно.Smt.Нэмэлт видео 3. (h) нь in vivo шархлаат колит (UC) үед олж авсан гүдгэр зургийг харуулж байна.Энэ үрэвсэлт байдал нь гажсан криптийн бүтэц (сум) болон тод шилний эсүүдийг (g) харуулдаг.Флуоресцеин (f)-ийн өд нь эпителийн эсүүдээс гадагшилдаг бөгөөд энэ нь судасны нэвчилт нэмэгдэж байгааг илтгэнэ.Олон тооны үрэвсэлт эсүүд (сумнууд) нь lamina propria (lp) -д харагддаг.Smt.Нэмэлт видео 4. (k) нь Кроны колитийн (CC) бүс нутгаас in vivo олж авсан төвлөрсөн зургийг харуулж байна.Энэ үрэвсэлт байдал нь гажсан криптийн бүтэц (сум) болон тод шилний эсүүдийг (g) харуулдаг.Флуоресцеин (f)-ийн өд нь эпителийн эсүүдээс гадагшилдаг бөгөөд энэ нь судасны нэвчилт нэмэгдэж байгааг илтгэнэ.Олон тооны үрэвсэлт эсүүд (сумнууд) нь lamina propria (lp) -д харагддаг.Smt.Нэмэлт видео 5. (b, d, h, l) LabVIEW 2021 ашиглан боловсруулсан зургууд.
Шархлаат колит (UC) (Зураг 4g-i) ба Кроны колит (Зураг 4j-l) зэрэг бүдүүн гэдэсний үрэвслийн ижил төстэй зургийг үзүүлэв.Үрэвслийн хариу урвал нь цухуйсан шилний эсүүд бүхий гажсан крипт бүтэцээр тодорхойлогддог гэж үздэг.Флуоресцеин нь эпителийн эсээс шахагдаж, судасны нэвчилт нэмэгдэж байгааг харуулж байна.Давхаргын давхаргад олон тооны үрэвслийн эсүүд ажиглагдаж болно.
Бид in vivo дүрс авахын тулд алслагдсан байрлалтай MEMS сканнер ашигладаг уян хатан шилэн холболттой конфокаль лазер дурангийн эмнэлзүйн хэрэглээг харуулсан.Резонансын давтамж дээр 20 Гц хүртэлх фрэймийн хурдыг өндөр нягтралтай Lissajous сканнерын горимыг ашиглан хөдөлгөөний олдворыг багасгах боломжтой.Оптик замыг нугалж, туяа тэлэх, 1.1 μм-ийн хажуугийн нарийвчлалд хүрэх хангалттай тоон нүх гаргах боломжтой.Гистологийн чанарын флюресцент зургийг бүдүүн гэдэсний хэвийн салст бүрхэвч, гуурсан хоолойн аденома, гиперпластик полип, шархлаат колит, Кроны колит зэрэгт ердийн колоноскопи хийх үед авсан.Колоноцит, гоблет эс, үрэвслийн эс зэрэг нэг эсийг тодорхойлж болно.Салст бүрхэвчийн шинж чанарууд болох криптийн бүтэц, криптийн хөндий, ламина проприа зэргийг ялгаж салгаж болно.Нарийвчилсан тоног төхөөрөмж нь 2.4 мм диаметр х 10 мм урттай багажийн доторх бие даасан оптик болон механик бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг нарийн уялдуулахын тулд бичил боловсруулалт хийдэг.Оптик дизайн нь эмнэлгийн дурангийн стандарт хэмжээтэй (3.2 мм диаметртэй) ажлын сувгаар шууд дамжихын тулд хатуу алсын үзүүрийн уртыг хангалттай хэмжээгээр багасгадаг.Тиймээс үйлдвэрлэгчээс үл хамааран төхөөрөмжийг оршин суугаа газрын эмч нар өргөнөөр ашиглах боломжтой.λex = 488 нм-д өдөөлтийг хийж, өндөр тодосгогчийг авахын тулд FDA-ийн зөвшөөрөгдсөн будаг болох флуоресцеиныг өдөөсөн.Эмнэлзүйн хувьд хүлээн зөвшөөрөгдсөн ариутгалын аргуудыг ашиглан багажийг 18 циклийн турш асуудалгүйгээр дахин боловсруулсан.
Өөр хоёр багажийн загварыг эмнэлзүйн хувьд баталгаажуулсан.Cellvizio (Mauna Kea Technologies) нь флюресценцийн зургийг цуглуулж, дамжуулахын тулд олон горимын уялдаатай шилэн кабелийн багцыг ашигладаг датчик дээр суурилсан конфокаль лазер дуран (pCLE) юм.Суурь станц дээр байрлах галво толь нь проксимал төгсгөлд хажуугийн сканнер хийдэг.Оптик хэсгүүдийг 0-ээс 70 мкм гүнтэй хэвтээ (XY) хавтгайд цуглуулдаг.Микропробын иж бүрдэл нь 0.91 (19 Г зүү) -ээс 5 мм диаметртэй байдаг.Хажуугийн нарийвчлал нь 1-ээс 3.5 µm-т хүрсэн.Зургийг 9-12 Гц давтамжтайгаар 240-600 мкм-ийн нэг хэмжээст харах талбараар цуглуулсан.Энэхүү платформыг цөсний суваг, давсаг, бүдүүн гэдэс, улаан хоолой, уушиг, нойр булчирхай зэрэг янз бүрийн хэсэгт эмнэлзүйн хувьд ашиглаж ирсэн.Optiscan Pty Ltd нь мэргэжлийн дурангийн (EC-3870K, Pentax Precision Instruments) 17 оруулах хоолойд (алслагдсан төгсгөл) суурилуулсан сканнерын хөдөлгүүртэй дурангийн үндсэн дээр төвлөрсөн лазер дурангийн (eCLE) бүтээжээ.Оптик хэсгийг нэг горимт утас ашиглан хийсэн бөгөөд хажуугийн сканнерыг резонансын тохируулагч сэрээгээр дамжуулан консол механизм ашиглан гүйцэтгэсэн.Хэлбэрийн санах ойн хайлш (нитинол) идэвхжүүлэгчийг тэнхлэгийн шилжилтийг бий болгоход ашигладаг.Confocal модулийн нийт диаметр нь 5 мм байна.Фокуслахад NA = 0.6 тоон диафрагм бүхий GRIN линзийг ашигладаг.Хэвтээ зургуудыг 0.7 ба тэнхлэгийн нарийвчлалтайгаар 0.8–1.6 Гц фрэймийн давтамж, 500 μм × 500 μм харах талбараар тус тус авсан.
Бид дистал төгсгөлийн MEMS сканнер ашиглан эмнэлгийн дурангийн тусламжтайгаар хүний ​​биеэс in vivo флюресценцийн дүрслэлийг авахын тулд эсийн доторх нягтралыг харуулж байна.Флюресценц нь зургийн өндөр тодосгогчийг бий болгодог бөгөөд эсийн гадаргуугийн зорилтот бодисуудтай холбогддог лигандуудыг флюрофороор тэмдэглэж, өвчний оношийг сайжруулахын тулд молекулын шинж чанарыг өгдөг18.In vivo микро эндоскопи хийх бусад оптик аргуудыг мөн боловсруулж байна. OCT нь өргөн зурвасын гэрлийн эх үүсвэрийн богино когерентийн уртыг ашиглан босоо хавтгайд >1 мм19 гүнтэй зургийг цуглуулдаг. OCT нь өргөн зурвасын гэрлийн эх үүсвэрийн богино когерентийн уртыг ашиглан босоо хавтгайд >1 мм19 гүнтэй зургийг цуглуулдаг. ОКТ ашиглаж байгаа короткую длину когерентности широкополосного источника света для сбора изображений в вертикальной плоскости с глубиной >1 мм19. OCT нь өргөн зурвасын гэрлийн эх үүсвэрийн богино когерентийн уртыг ашиглан босоо хавтгайд >1 мм гүнтэй зургийг авдаг19. OCT 使用宽带光源的短相干长度来收集垂直平面中深度> 1 мм19 的图像。1 мм19 的图像。 ОКТ ашиглаж байгаа короткую длину когерентности широкополосного источника света для сбора изображений на глубине >1 мм19 в вертикальной плоскости. OCT нь босоо хавтгайд >1 мм19 дүрсийг авахын тулд өргөн зурвасын гэрлийн эх үүсвэрийн богино когерентийн уртыг ашигладаг.Гэсэн хэдий ч энэхүү бага тодосгогч арга нь арын сарнисан гэрлийн цуглуулгад тулгуурладаг бөгөөд зургийн нарийвчлал нь толбоны олдвороор хязгаарлагддаг.Фотоакустик дурангийн дуран нь дууны долгион үүсгэдэг лазер импульсийг шингээсний дараа эдэд хурдан дулаан уян хатан тэлэлтэнд үндэслэн in vivo дүрсийг үүсгэдэг20. Энэ арга нь эмчилгээг хянахын тулд хүний ​​бүдүүн гэдсэнд 1 см-ээс дээш гүн дүрслэлийг харуулсан. Энэ арга нь эмчилгээг хянахын тулд хүний ​​бүдүүн гэдсэнд 1 см-ээс дээш гүн дүрслэлийг харуулсан. Этот подход продемонстрировали глубину визуализации > 1 см в толстой кишке хүн амын in vivo нь мониторингийн эмчилгээ. Энэ арга нь хүний ​​бүдүүн гэдсэнд 1 см-ээс дээш гүн дүрслэл авах боломжтойг in vivo эмчилгээний хяналтаар харуулсан.这种方法已经证明在体内人结肠中成像深度> 1 厘米以监测治疗。这种方法已经证明在体内人结肠中成像深度> 1 Мониторингын эмчилгээний зорилгоор хүн амын шилжилт хөдөлгөөн > 1 см-ээс дээш хэмжээтэй байна. Энэ аргыг хүний ​​бүдүүн гэдсэнд 1 см-ээс дээш гүнд дүрслэл хийх үед эмчилгээг хянах зорилгоор in vivo байдлаар харуулсан.Эсрэг бодисыг голчлон судас дахь гемоглобин үүсгэдэг.Хоёр ба түүнээс дээш NIR фотонууд эдийн биомолекулуудад нэгэн зэрэг тусах үед мультифотон дуран нь өндөр тодосгогч флюресценцийн дүрсийг үүсгэдэг21. Энэ арга нь гэрэл зургийн хоруу чанар багатай 1 мм-ээс их гүнд зураг авах боломжтой. Энэ арга нь гэрэл зургийн хоруу чанар багатай 1 мм-ээс их гүнд зураг авах боломжтой. Этот подход может обеспечить глубину изображения > 1 мм-ийн нягт фототоксичностью. Энэ арга нь фото хоруу чанар багатай, 1 мм-ээс их хэмжээтэй зургийн гүнийг хангаж чадна.这种方法可以实现>1 毫米的成像深度，光毒性低。这种方法可以实现>1 毫米的成像深度，光毒性低。 Этот подход может обеспечить глубину изображения > 1 мм-ийн нягт фототоксичностью. Энэ арга нь фото хоруу чанар багатай, 1 мм-ээс их хэмжээтэй зургийн гүнийг хангаж чадна.Өндөр эрчимтэй фемтосекунд лазерын импульс шаардлагатай бөгөөд дурангийн шинжилгээний явцад энэ аргыг эмнэлзүйн хувьд нотлоогүй байна.
Энэхүү прототипт сканнер нь зөвхөн хажуугийн хазайлтыг гүйцэтгэдэг тул оптик хэсэг нь хэвтээ (XY) хавтгайд байрладаг.Уг төхөөрөмж нь Cellvizio систем дэх гальван толь (12 Гц)-ээс илүү өндөр фрэймийн давтамжтай (20 Гц) ажиллах чадвартай.Хөдөлгөөний олдворуудыг багасгахын тулд фрэймийн хурдыг нэмэгдүүлж, дохиог нэмэгдүүлэхийн тулд фрэймийн хурдыг бууруулна уу.Дурангийн хөдөлгөөн, амьсгалын замын хөдөлгөөн, гэдэсний гүрвэлзэх хөдөлгөөн зэргээс үүдэлтэй том хөдөлгөөний олдворуудыг багасгахын тулд өндөр хурдтай, автоматжуулсан алгоритмууд хэрэгтэй.Параметрийн резонансын сканнерууд нь хэдэн зуун микроноос илүү тэнхлэгийн шилжилтийг хийдэг болохыг харуулсан22. Гистологи (H&E) -тэй ижил харагдахын тулд зургийг салст бүрхүүлийн гадаргуутай перпендикуляр босоо хавтгайд (XZ) цуглуулж болно. Гистологи (H&E) -тэй ижил харагдахын тулд зургийг салст бүрхүүлийн гадаргуутай перпендикуляр босоо хавтгайд (XZ) цуглуулж болно. Изображения боломжтой вертикальной плоскости (XZ), перпендикулярной поверхности слизистой оболочки, чтобы обеспечить такое болон изображение, как при гистологии (H&E). Гистологийн (H&E) ижил дүрсийг өгөхийн тулд салст бүрхүүлийн гадаргуутай перпендикуляр босоо хавтгайд (XZ) зургийг авч болно.可以在垂直于粘膜表面的垂直平面(XZ) 中收集图像，以提供与组织学(H&E)。可以在垂直于粘膜表面的垂直平面(XZ) 中收集图像，以提供与组织学(H&E) Изображения вертикальной плоскости (XZ), перпендикулярной поверхности слизистой оболочки, чтобы обеспечить такое болон изображение, как при гистологическом исследовании (H&E). Гистологийн шинжилгээтэй (H&E) ижил дүрсийг өгөхийн тулд салст бүрхүүлийн гадаргуутай перпендикуляр босоо хавтгайд (XZ) зургийг авч болно.Сканнерыг гэрэлтүүлгийн туяа үндсэн оптик тэнхлэгийн дагуу унадаг объектын дараах байрлалд байрлуулж, гажуудал үүсэх мэдрэмжийг бууруулж болно8.Бараг дифракцаар хязгаарлагдмал фокусын эзэлхүүн нь дур зоргоороо том харааны талбарт хазайж болно.Цацруулагчийг хэрэглэгчийн тодорхойлсон байрлалд шилжүүлэхийн тулд санамсаргүй хандалтын сканнер хийж болно9.Зургийн дурын хэсгүүдийг тодруулахын тулд харах талбарыг багасгаж, дохио-шуугианы харьцаа, тодосгогч, фрэймийн хурдыг сайжруулж болно.Энгийн процессуудыг ашиглан сканнеруудыг олноор үйлдвэрлэж болно.Хямд өртөгтэй масс үйлдвэрлэх, өргөн тархах зорилгоор үйлдвэрлэлийг нэмэгдүүлэхийн тулд цахиур хавтан бүр дээр хэдэн зуун төхөөрөмжийг хийж болно.
Эвхэгдсэн гэрлийн зам нь хатуу алслагдсан үзүүрийн хэмжээг багасгаж, ердийн колоноскопи хийх үед дурангийн нэмэлт хэрэгсэл болгон ашиглахад хялбар болгодог.Үзүүлсэн флюресцент зурган дээр салст бүрхүүлийн эсийн доорх шинж чанарууд нь гуурсан хоолойн аденома (хорт хавдрын өмнөх) нь гиперпластик полип (хоргүй) -ээс ялгах боломжтой.Эдгээр үр дүн дурангийн шинжилгээ нь шаардлагагүй биопсийн тоог бууруулах боломжтойг харуулж байна23.Хагалгаатай холбоотой ерөнхий хүндрэлийг багасгаж, хяналтын интервалыг оновчтой болгож, бага зэргийн гэмтэлийн гистологийн шинжилгээг багасгах боломжтой.Бид мөн шархлаат колит (UC) болон Кроны колит зэрэг гэдэсний үрэвсэлт өвчтэй өвчтөнүүдийн in vivo зургийг харуулж байна.Уламжлалт цагаан гэрлийн колоноскопи нь салст бүрхүүлийн эдгэрэлтийг үнэн зөв үнэлэх хязгаарлагдмал чадвартай салст бүрхүүлийн гадаргуугийн макроскопоор харуулдаг.Анти-TNF24 эсрэгбие зэрэг биологийн эмчилгээний үр нөлөөг үнэлэхийн тулд дурангийн шинжилгээг in vivo ашиглаж болно.Нарийвчлалтай in vivo үнэлгээ нь өвчний дахилт, мэс засал зэрэг хүндрэлээс урьдчилан сэргийлэх, амьдралын чанарыг сайжруулах боломжтой.Флуоресцен агуулсан дурангийн дураныг in vivo25 хэрэглэхтэй холбоотой эмнэлзүйн судалгаагаар ноцтой гаж нөлөө илрээгүй. Салст бүрхүүлийн гадаргуу дээрх лазерын хүчийг дулааны гэмтлийн эрсдлийг багасгах, 21 CFR 812 тутамд чухал бус эрсдэлийн FDA-ийн шаардлагыг хангахын тулд <2 мВт-аар хязгаарласан. Салст бүрхүүлийн гадаргуу дээрх лазерын хүчийг дулааны гэмтлийн эрсдлийг багасгах, 21 CFR 812 тутамд FDA-ийн чухал бус эрсдэлийн шаардлагыг хангахын тулд <2 мВт-аар хязгаарласан. Мощность лазера на поверхности слизистой оболочки была ограничена до <2 мВт, чтобы свести к минимуму риск термического повреждения болон хариу арга хэмжээ авах шаардлагатай FDA otnositelno neznachitelnogo riska21 C218. Дулааны гэмтлийн эрсдлийг багасгах, 21 CFR 812 стандартын дагуу FDA-ийн шаардлагыг хангахын тулд салст бүрхүүлийн гадаргуу дээрх лазерын хүчийг <2 мВт-аар хязгаарласан.粘膜表面的激光功率限制在<2 мВт，以最大限度地降低热损伤风险，并满风险，并满2表险，并满风险，并满制在<2 мВт.风险26 的要求。粘膜表面的激光功率限制在<2 мВт Мощность лазера на поверхности слизистой оболочки была ограничена до <2 мВт, чтобы свести к минимуму риск термического повреждения болон соответствовать требованиям FDA 21 CFR 812 относительно незначитель26. Дулааны гэмтлийн эрсдэлийг багасгах, FDA 21 CFR 812-ын шаардлагад нийцүүлэхийн тулд салст бүрхүүлийн гадаргуу дээрх лазерын хүчийг <2 мВт-аар хязгаарласан.
Зургийн чанарыг сайжруулахын тулд багажийн дизайныг өөрчилж болно.Бөмбөрцөг хэлбэрийн гажуудлыг багасгах, зургийн нягтралыг сайжруулах, ажлын зайг нэмэгдүүлэх тусгай оптикууд байдаг.Гэрлийн холболтыг сайжруулахын тулд SIL-ийг эд эсийн хугарлын илтгэгчтэй (~1.4) илүү тааруулахын тулд тохируулж болно.Сканнерын хажуугийн өнцгийг нэмэгдүүлж, зургийн талбарыг өргөжүүлэхийн тулд хөтчийн давтамжийг тохируулж болно.Та энэ нөлөөг багасгахын тулд мэдэгдэхүйц хөдөлгөөнтэй зургийн жаазыг арилгах автомат аргуудыг ашиглаж болно.Өндөр хурдтай өгөгдөл цуглуулах талбарт програмчлагдсан хаалганы массив (FPGA) нь бодит цагийн бүрэн фрэймийн өндөр гүйцэтгэлтэй залруулга хийх болно.Эмнэлзүйн хувьд илүү үр дүнтэй байхын тулд автоматжуулсан аргууд нь бодит цагийн дүрсийг тайлбарлахын тулд фазын шилжилт, хөдөлгөөний олдворуудыг засах ёстой.Тэнхлэгийн сканнерыг нэвтрүүлэхийн тулд цул 3 тэнхлэгт параметрийн резонансын сканнерыг хэрэгжүүлж болно 22 . Эдгээр төхөөрөмжийг зөөлрүүлэх/хөшүүжүүлэх динамик хосолсон горимд хөтчийн давтамжийг тохируулах замаар урьд өмнө байгаагүй босоо шилжилтийг >400 μм болгох зорилгоор бүтээгдсэн болно27. Эдгээр төхөөрөмжийг зөөлрүүлэх/хөшүүжүүлэх динамик хосолсон горимд хөтчийн давтамжийг тохируулах замаар урьд өмнө байгаагүй босоо шилжилтийг >400 μм болгох зорилгоор бүтээгдсэн болно27. Босоо зайд 400 мкм-ээс доошгүй зайд хүрэхийн тулд ямар ч төхөөрөмж ашиглах боломжтой бөгөөд энэ нь горимд шилжих боломжтой бөгөөд энэ нь динамик смягчения/жесткости27 юм. Эдгээр төхөөрөмжүүд нь холимог зөөлөн/хатуу динамикаар тодорхойлогддог горимд хөтчийн давтамжийг тохируулах замаар 400 μм-ээс дээш босоо шилжилтийг урьд өмнө үзэгдээгүй байхаар зохион бүтээсэн.这些设备的开发是为了通过在具有混合软化/硬化动力学的状态下调整颀发是为了通过在具有混合软化有的>400 μm 的垂直位移27。这些 设备 的 开发 是 为了 在 具有 混合 软化 硬化 硬化 学 学 状态 学 学 状态 为了 在 具有现 的> 400 μm 的 垂直 位移 27。 Босоо байрлалтай >400 мкм путем настройки частоты срабатывания в режиме со смешанной кинетикой размягчения/затвердевания27. Эдгээр төхөөрөмжүүд нь холимог зөөлрүүлэх/хатууруулах кинетик горимд гох давтамжийг тохируулах замаар 400 мкм-ээс дээш босоо шилжилтийг урьд өмнө хэзээ ч байгаагүй болгохоор бүтээгдсэн.Ирээдүйд босоо хөндлөн дүрслэл нь хорт хавдрын эхний үе шатыг (T1a) тодорхойлоход тусална.Сканнерийн хөдөлгөөнийг хянах, фазын шилжилтийг 28 засахын тулд багтаамж мэдрэгчтэй хэлхээг хэрэгжүүлж болно.Мэдрэгчийн хэлхээг ашиглан фазын автомат тохируулга нь хэрэглэхийн өмнө гар аргаар багажийн тохируулгыг орлуулж болно.Боловсруулалтын мөчлөгийн тоог нэмэгдүүлэхийн тулд илүү найдвартай багажийг битүүмжлэх арга техникийг ашиглан багажийн найдвартай байдлыг сайжруулж болно.MEMS технологи нь хөндий эрхтнүүдийн хучуур эдийг дүрслэн харуулах, өвчнийг оношлох, эмчилгээг бага зэргийн инвазив аргаар хянах зорилгоор дурангийн дурангийн хэрэглээг хурдасгах болно гэж амлаж байна.Цаашид хөгжихийн хэрээр энэхүү шинэ дүрслэлийн арга нь гистологийн шинжилгээнд яаралтай эмнэлгийн дурангийн нэмэлт болгон ашиглах хямд өртөгтэй шийдэл болж, улмаар уламжлалт эмгэг судлалын шинжилгээг орлох боломжтой юм.
Фокусын оптикийн параметрүүдийг тодорхойлохын тулд ZEMAX оптик дизайны програм хангамжийг (2013 оны хувилбар) ашиглан туяа хянах симуляцийг хийсэн.Дизайн шалгуурт ойрын дифракцийн тэнхлэгийн нягтрал, ажлын зай = 0 μм, 250 × 250 μм2-аас их харах талбай (FOV) багтана.λex = 488 нм долгионы урттай өдөөхөд нэг горимын утас (SMF) ашигласан.Флюресценцийн цуглуулгын хэлбэлзлийг багасгахын тулд ахроматик давхаруудыг ашигладаг (Зураг 5a).Цацраг нь 3.5 мкм-ийн горимын талбайн диаметртэй SMF-ээр дамждаг бөгөөд огтлолтгүйгээр 50 мкм-ийн нүхний диаметртэй тусгалын төвөөр дамждаг.Хугарлын өндөр үзүүлэлттэй (n = 2.03) хатуу дүрэх (хагас бөмбөрцөг) линз ашиглан бөмбөрцөг хэлбэрийн гажигийг багасгаж, салст бүрхэвчтэй бүрэн холбоо тогтооно.Фокусын оптик нь нийт NA = 0.41-ийг өгдөг бөгөөд энд NA = nsinα, n нь эд эсийн хугарлын илтгэгч, α нь хамгийн их цацрагийн нэгдэх өнцөг юм.NA = 0.41, λ = 488 нм, n = 1.3313-ийг ашиглан дифракцийн хязгаарлагдмал хажуугийн болон тэнхлэгийн нарийвчлал нь 0.44 ба 6.65 мкм байна.Гадна диаметр (OD) ≤ 2 мм-ийн зөвхөн худалдаанд гарсан линзийг авч үзсэн.Оптик зам нь нугалж, SMF-ээс гарах цацраг нь сканнерын төв нүхээр дамжин өнгөрч, тогтмол толин тусгалаар (0.29 мм диаметртэй) тусдаг.Энэхүү тохиргоо нь эмнэлгийн дурангийн стандарт (3.2 мм диаметртэй) ажлын сувгаар дуранг урагшлахад хялбар болгох үүднээс хатуу алсын төгсгөлийн уртыг богиносгодог.Энэ функц нь ердийн дурангийн үед нэмэлт хэрэгсэл болгон ашиглахад хялбар болгодог.
Эвхэгдсэн гэрлийн хөтөч, дурангийн савлагаа.(a) Өдөөлтийн цацраг нь OBC-ээс гарч, сканнерын төв нүхээр дамждаг.Цацрагыг сунгаж, тогтмол дугуй толиноос сканнер руу буцааж, хажуугийн хазайлтыг тусгасан болно.Фокусын оптик нь хос achromatic давхар линз ба салст бүрхүүлийн гадаргуутай холбоо тогтоох хатуу дүрэх (хагас бөмбөрцөг) линзээс бүрдэнэ.ZEMAX 2013 (https://www.zemax.com/) нь оптик дизайн болон туяа хянах симуляцид зориулагдсан.(б) Нэг горимын шилэн (SMF), сканнер, толь, линз зэрэг янз бүрийн хэрэгслийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн байршлыг харуулна.Solidworks 2016 (https://www.solidworks.com/)-ийг дурангийн савлагааны 3D загварчлалд ашигласан.
488 нм долгионы урттай 3.5 μм горимын талбайн диаметр бүхий SMF (#460HP, Thorlabs)-ийг голомтгүй гэрлийг орон зайн шүүх "нүх" болгон ашигласан (Зураг 5б).SMFs нь уян хатан полимер хоолойд (#Pebax 72D, Nordson MEDICAL) хаалттай байдаг.Өвчтөн болон дүрслэх системийн хооронд хангалттай зайг хангахын тулд ойролцоогоор 4 метрийн уртыг ашигладаг.Цацрагт анхаарлаа төвлөрүүлж, флюресценц цуглуулахад 2 мм-ийн MgF2 бүрсэн акроматик давхар линз (#65568, #65567, Edmund Optics) болон 2 мм-ийн бүрхүүлгүй хагас бөмбөрцөг линз (#90858, Edmund Optics) ашигласан.Сканнерийн чичиргээг тусгаарлахын тулд давирхай болон гадна хоолойн хооронд зэвэрдэггүй ган төгсгөлийн хоолойг (4 мм урт, 2.0 мм OD, 1.6 мм ID) оруулна.Багажийг биеийн шингэнээс хамгаалахын тулд эмнэлгийн наалдамхай бодисыг ашиглана уу.Холбогчийг хамгаалахын тулд дулаан агшилтын хоолойг ашиглана.
Компакт сканнер нь параметрийн резонансын зарчмаар хийгдсэн.Өдөөлтийн цацрагийг дамжуулахын тулд тусгалын төвд 50 μм-ийн нүхийг сийлнэ.Дөрвөлжин самнасан хөтчүүдийн багцыг ашиглан өргөтгөсөн цацрагийг Lissajous горимд ортогональ чиглэлд (XY хавтгай) хөндлөн хазайлгана.Өгөгдөл цуглуулах самбарыг (#DAQ PCI-6115, NI) сканнерыг удирдах аналог дохиог үүсгэхэд ашигласан.Эрчим хүчийг өндөр хүчдэлийн өсгөгчөөр (#PDm200, PiezoDrive) нимгэн утсаар (#B4421241, MWS Wire Industries) хангасан.Электродын арматур дээр утас хийх.Сканнер нь 15 кГц (хурдан тэнхлэг) ба 4 кГц (удаан тэнхлэг) ойролцоо давтамжтайгаар ажилладаг бөгөөд FOV 250 μm × 250 µm хүртэл байдаг.Видеог 10, 16, 20 Гц-ийн фрэймийн давтамжтайгаар авах боломжтой.Эдгээр фрэймийн хурдыг Lissajous сканнерын загварын давталтын хурдтай тааруулахын тулд ашигладаг бөгөөд энэ нь сканнерын X ба Y өдөөх давтамжийн утгаас хамаардаг29.Хүрээний хурд, пикселийн нягтрал, сканнерын хэв маягийн нягтралын хоорондын уялдаа холбоотой дэлгэрэнгүй мэдээллийг бидний өмнөх ажил14-д үзүүлэв.
Хатуу төлөвт лазер (#OBIS 488 LS, уялдаа холбоотой) нь зургийн тодосгогчийг флуоресцеиныг өдөөхийн тулд λex = 488 нм-ээр хангадаг (Зураг 6a).Оптик pigtails нь FC/APC холбогчоор (алдагдал 1.82 дБ) шүүлтүүрийн нэгжид холбогддог (Зураг 6б).Цацрагыг өөр FC/APC холбогчоор дамжуулан SMF-д байгаа дихроик толь (#WDM-12P-111-488/500:600, Oz Optics) хазайлгана.21 CFR 812-ын дагуу эд эсэд нөлөөлж буй хүчийг хамгийн ихдээ 2 мВт-аар хязгаарладаг бөгөөд FDA-ийн шаардлагыг үл тоомсорлодог.Флюресценцийг дикроик толь болон урт дамжуулагч шүүлтүүрээр (#BLP01-488R, Semrock) дамжуулсан.Флюресценцийг FC/PC холбогчоор дамжуулан фото үржүүлэгч хоолой (PMT) илрүүлэгч рүү (#H7422-40, Хамамацу) 50 μм гол диаметртэй ~1 м урт multimode утас ашиглан дамжуулсан.Флюресцент дохиог өндөр хурдны гүйдлийн өсгөгчөөр (#59-179, Edmund Optics) өсгөсөн.Бодит цагийн өгөгдөл цуглуулах, зураг боловсруулах тусгай программ хангамжийг (LabVIEW 2021, NI) боловсруулсан.Лазерын хүч ба PMT-ийн өсөлтийн тохиргоог тусгай хэвлэмэл хэлхээний самбар ашиглан микроконтроллер (#Arduino UNO, Arduino) тодорхойлно.SMF болон утаснууд нь холбогчоор төгсөж, үндсэн станц дээрх шилэн кабелийн (F) болон утастай (W) портуудтай холбогддог (Зураг 6c).Дүрслэх систем нь зөөврийн тэргэнцэр дээр байрладаг (Зураг 6d). Алдагдлын гүйдлийг <500 мкА хүртэл хязгаарлахын тулд тусгаарлах трансформаторыг ашигласан. Алдагдлын гүйдлийг <500 мкА хүртэл хязгаарлахын тулд тусгаарлах трансформаторыг ашигласан. Для ограничения тока утечки до <500 мкА ашиглаж болно изолирующий трансформатор. Алдагдлын гүйдлийг <500 мкА хүртэл хязгаарлахын тулд тусгаарлах трансформаторыг ашигласан.使用隔离变压器将泄漏电流限制在<500 μA。 <500 мкА. Используйте изолирующий трансформатор, чтобы ограничить ток утечки до <500 мкА. Алдагдлын гүйдлийг <500μA хүртэл хязгаарлахын тулд тусгаарлах трансформаторыг ашиглана.
дүрслэх систем.(a) PMT, лазер болон өсгөгч нь үндсэн станцад байна.(б) Шүүлтүүрийн хэсэгт лазер (цэнхэр) FC/APC холбогчоор шилэн кабелиар дамждаг.Цацраг нь хоёрдогч FC/APC холбогчоор дамжуулан нэг горимын шилэн (SMF) руу дикроик толь (DM) -ээр хазайдаг.Флюресценц (ногоон) нь DM ба урт дамжуулалтын шүүлтүүрээр (LPF) дамжин олон горимт шилэн (MMF) дамжуулан PMT руу дамждаг.(в) Дурангийн проксимал төгсгөл нь үндсэн станцын шилэн кабелийн (F) болон утастай (W) портуудтай холбогдсон байна.(г) Дуран, монитор, суурь станц, компьютер, зөөврийн тэргэнцэрт тусгаарлах трансформатор.(a, c) Solidworks 2016 програмыг дүрслэх систем болон дурангийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн 3D загварчлалд ашигласан.
Фокусын оптикийн хажуугийн болон тэнхлэгийн нарийвчлалыг 0.1 μм диаметртэй флюресцент микро бөмбөрцгийн (#F8803, Thermo Fisher Scientific) цэгийн тархалтын функцээр хэмжсэн.Шугаман үе шат (# M-562-XYZ, DM-13, Ньюпорт) ашиглан микро бөмбөрцөгийг хэвтээ ба босоо байдлаар 1 μм алхамаар хөрвүүлэн зураг цуглуул.Микро бөмбөрцгийн хөндлөн огтлолын зургийг авахын тулд ImageJ2 ашиглан зургийн стек.
Бодит цагийн өгөгдөл цуглуулах, зураг боловсруулах тусгай программ хангамжийг (LabVIEW 2021, NI) боловсруулсан.Зураг дээр.7-д системийг ажиллуулахад ашигладаг горимуудын тоймыг харуулав.Хэрэглэгчийн интерфейс нь өгөгдөл цуглуулах (DAQ), үндсэн самбар, хяналтын самбараас бүрдэнэ.Мэдээлэл цуглуулах самбар нь үндсэн самбартай харилцаж, түүхий өгөгдлийг цуглуулах, хадгалах, захиалгат өгөгдөл цуглуулах тохиргоонд оролт өгөх, сканнер драйверын тохиргоог удирдах боломжтой.Үндсэн самбар нь сканнерын хяналтын дохио, видео фрэймийн хурд, зураг авалтын параметрүүдийг багтаасан дурангаар ашиглахад шаардлагатай тохиргоог сонгох боломжийг хэрэглэгчдэд олгодог.Энэхүү самбар нь хэрэглэгчдэд зургийн тод байдал, тодосгогчийг харуулах, хянах боломжийг олгодог.Түүхий өгөгдлийг оролт болгон ашигласнаар алгоритм нь PMT-ийн оновчтой ашгийн тохиргоог тооцоолж, пропорциональ-интеграл (PI)16 санал хүсэлтийн хяналтын системийг ашиглан энэ параметрийг автоматаар тохируулдаг.Хяналтын самбар нь үндсэн самбар болон өгөгдөл цуглуулах самбартай харилцан үйлчилж, лазерын хүч болон PMT-ийн өсөлтийг хянадаг.
Системийн програм хангамжийн архитектур.Хэрэглэгчийн интерфейс нь (1) өгөгдөл цуглуулах (DAQ), (2) үндсэн самбар ба (3) хяналтын самбараас бүрдэнэ.Эдгээр программууд нь зэрэгцэн ажиллаж, мессежийн дарааллаар дамжуулан хоорондоо харилцдаг.Гол нь MEMS: Микроэлектромеханик систем, TDMS: Техникийн мэдээллийн хяналтын урсгал, PI: Пропорциональ интеграл, PMT: Фото үржүүлэгч.Зураг болон видео файлуудыг BMP болон AVI форматаар тус тус хадгалдаг.
Зургийг хурцлахад ашигласан хамгийн их утгыг тодорхойлохын тулд фазын залруулгын алгоритмыг өөр өөр фазын утгууд дахь зургийн пикселийн эрчмийн тархалтыг тооцоолоход ашигладаг.Бодит цагийн залруулгын хувьд тооцооллын хугацааг багасгахын тулд фазын скан хийх хүрээ нь ± 2.86 ° бөгөөд харьцангуй том алхам нь 0.286 ° байна.Нэмж дурдахад цөөн тооны дээж бүхий зургийн хэсгүүдийг ашиглах нь зургийн жаазыг тооцоолох хугацааг 7.5 секундээс (1 Msample) 1.88 секунд (250 Ksample) хүртэл 10 Гц хүртэл багасгадаг.Эдгээр оролтын параметрүүдийг in vivo дүрслэлийн явцад хамгийн бага хоцрогдолтой, хангалттай зургийн чанарыг хангах зорилгоор сонгосон.Шууд зураг болон видео бичлэгүүдийг BMP болон AVI форматаар тус тус бичдэг.Түүхий өгөгдлийг Техникийн мэдээллийн удирдлагын урсгалын формат (TMDS) -д хадгалдаг.
LabVIEW 2021-ээр чанарыг сайжруулахын тулд in vivo зургийн дараах боловсруулалт. Тооцоолоход урт хугацаа шаардагддаг тул in vivo дүрслэлийн үед фазын залруулах алгоритмыг ашиглах үед нарийвчлал хязгаарлагдмал байдаг.Зөвхөн хязгаарлагдмал зургийн хэсэг болон дээжийн дугаарыг ашигладаг.Нэмж дурдахад, алгоритм нь хөдөлгөөнт олдвортой эсвэл бага тодосгогчтой зургуудад сайн ажиллахгүй бөгөөд фазын тооцооллын алдаа30-д хүргэдэг.Өндөр тодосгогч, хөдөлгөөнгүй бие даасан фрэймүүдийг 0.01 ° алхамаар ± 0.75 ° -ийн фазын сканнерын мужтай фазын нарийн тааруулахын тулд гараар сонгосон.Зургийн талбайг бүхэлд нь ашигласан (жишээ нь, 10 Гц-т бичигдсэн зургийн 1 M дээж).Хүснэгт S2 бодит цагийн болон дараах боловсруулалтад ашигласан зургийн параметрүүдийг дэлгэрэнгүй харуулав.Фазын залруулга хийсний дараа зургийн дуу чимээг багасгахын тулд медиан шүүлтүүрийг ашигладаг.Гистограмм сунгалт болон гамма залруулга31-ийн тусламжтайгаар тод байдал, тодосгогчийг улам сайжруулдаг.
Эмнэлзүйн туршилтыг Мичиганы эрүүл мэндийн байгууллагуудын хяналтын зөвлөл баталж, эмнэлгийн процедурын хэлтэст явуулсан.Энэхүү судалгаа нь ClinicalTrials.gov (NCT03220711, бүртгэлийн огноо: 07/18/2017) сайтад онлайнаар бүртгэгдсэн.Хамруулах шалгуурт өмнө нь төлөвлөсөн бүдүүн гэдэсний хорт хавдар тусах эрсдэл өндөртэй, гэдэсний үрэвсэлт өвчний түүхтэй өвчтөнүүд (18-100 насны) багтсан.Оролцохыг зөвшөөрсөн субъект бүрээс мэдээлэлтэй зөвшөөрөл авсан.Хасагдах шалгуур нь жирэмсэн байсан, флуоресцеинд хэт мэдрэгшилтэй эсвэл идэвхтэй хими эмчилгээ эсвэл цацраг туяа эмчилгээ хийлгэж байсан өвчтөнүүд байв.Энэхүү судалгаанд тогтмол колоноскопи хийхээр төлөвлөж буй дараалсан өвчтөнүүд хамрагдсан бөгөөд Мичиганы Анагаах Ухааны Төвийн хүн амын төлөөлөл байв.Судалгааг Хельсинкийн тунхаглалын дагуу явуулсан.
Хагалгааны өмнө дурангийн дуранг силикон хэвэнд суурилуулсан 10 микрон флюресцент бөмбөлгүүдийг (#F8836, Thermo Fisher Scientific) ашиглан тохируулна.Тунгалаг силикон чигжээсийг (#RTV108, Momentive) 3D хэвлэсэн 8 см3 хэмжээтэй хуванцар хэвэнд цутгасан.Усны флюресцент бөмбөлгүүдийг силикон дээр буулгаж, усны орчин хатах хүртэл үлдээгээрэй.
Бүдүүн гэдсийг бүхэлд нь цагаан гэрлээр гэрэлтүүлэх стандарт эмнэлгийн колоноскоп (Olympus, CF-HQ190L) ашиглан шалгасан.Дурангийн эмч өвчний сэжиглэгдсэн хэсгийг тодорхойлсны дараа тухайн хэсгийг 5-10 мл 5% цууны хүчил, дараа нь ариутгасан усаар угааж, салиа, хог хаягдлыг арилгана.5 мл-ийн тунгаар 5 мг/мл флуоресцеин (Alcon, Fluorescite) судсаар тарьж эсвэл ажлын сувгаар дамжсан стандарт суваг (M00530860, Boston Scientific) ашиглан салст бүрхэвч рүү шүршинэ.
Салст бүрхүүлийн гадаргуугаас илүүдэл будаг эсвэл хог хаягдлыг зайлуулахын тулд усалгааны төхөөрөмжийг ашиглана.Мананцар үүсгэгч катетерийг аваад үхлийн өмнөх зургийг авахын тулд дурангаар ажлын сувгаар дамжуулна.Өргөн хүрээний дурангийн удирдамж ашиглан алсын үзүүрийг зорилтот хэсэгт байрлуулна. Төвлөрсөн зургийг цуглуулахад зарцуулсан нийт хугацаа <10 минут байсан. Төвлөрсөн зургийг цуглуулахад зарцуулсан нийт хугацаа <10 минут байсан. Общее время, затраченное на сбор конфокальных изображений, составило <10 мин. Төвлөрсөн зургийг цуглуулахад зарцуулсан нийт хугацаа <10 минут байв.Төвлөрөлтэй зураг авах нийт хугацаа 10 минутаас бага байв.Дурангийн цагаан гэрлийн видеог Olympus EVIS EXERA III (CLV-190) дүрслэлийн системийг ашиглан боловсруулж, Elgato HD видео бичигч ашиглан бичсэн.LabVIEW 2021 ашиглан дурангийн видео бичлэг хийж хадгалаарай.Дүрслэл хийж дууссаны дараа дурангийн дуранг авч, харагдах эдийг биопсийн хямсаа эсвэл урхи ашиглан тайрч авна. Эд эсийг ердийн гистологийн шинжилгээнд (H&E) боловсруулж, GI эмгэг судлаач (HDA) үнэлэв. Эд эсийг ердийн гистологийн шинжилгээнд (H&E) боловсруулж, GI эмгэг судлаач (HDA) үнэлэв. Гистологи (H&E) ба оцены экспертом-патологом желудочно-кишечного тракта (HDA)-д зориулагдсан. Эд эсийг ердийн гистологийн шинжилгээнд (H&E) боловсруулж, ходоод гэдэсний замын эмгэг судлаач (HDA) үнэлэв.对组织进行常规组织学(H&E) 处理，并由专家GI 病理学家(HDA) 进行评估。对组织进行常规组织学(H&E) 处理，并由专家GI 病理学家(HDA) 进行评估。 Гистологи (H&E) ба оцены экспертом-патологом желудочно-кишечного тракта (HDA)-д зориулагдсан. Эд эсийг ердийн гистологийн шинжилгээнд (H&E) боловсруулж, ходоод гэдэсний замын эмгэг судлаач (HDA) үнэлэв.Флуоресцеины спектрийн шинж чанарыг Зураг S2-т үзүүлсэн шиг спектрометр (USB2000+, Ocean Optics) ашиглан баталгаажуулсан.
Дурангуудыг хүн хэрэглэх болгоны дараа ариутгана (Зураг 8).Цэвэрлэгээг Мичиганы Анагаах Ухааны Төвийн Халдвар хяналт, Эпидемиологийн хэлтэс, Төв ариутгал боловсруулах нэгжийн удирдлага, зөвшөөрлийн дагуу гүйцэтгэсэн. Судалгаанаас өмнө халдвараас урьдчилан сэргийлэх, ариутгах баталгаажуулалтын үйлчилгээ үзүүлдэг арилжааны байгууллага болох Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson)-ээр уг багажуудыг туршиж, ариутгал баталгаажуулсан. Судалгаанаас өмнө халдвараас урьдчилан сэргийлэх, ариутгах баталгаажуулалтын үйлчилгээ үзүүлдэг арилжааны байгууллага болох Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson)-ээр уг багажуудыг туршиж, ариутгал баталгаажуулсан. Нарийвчилсан ариутгалын бүтээгдэхүүнүүд (ASP, Johnson & Johnson), халдваргүйжүүлэлтээс урьдчилан сэргийлэх, халдваргүйжүүлэх үйлчилгээ үзүүлэх, ариутгах, ариутгах зэрэгт туслах хэрэгслүүд болон ариутгал халдваргүйжүүлэлтийн компанийг өмнө нь хэрэглэсэн. Судалгаанд хамрагдахаас өмнө халдвараас урьдчилан сэргийлэх, ариутгах баталгаажуулалтын үйлчилгээ үзүүлдэг худалдааны байгууллага болох Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson)-аас багажуудыг туршиж, ариутгах зөвшөөрөл авсан. Ариутгалын дэвшилтэт бүтээгдэхүүнүүд (ASP, Johnson & Johnson), халдваргүйжүүлэлт, халдваргүйжүүлэлтээс урьдчилан сэргийлэх зорилгоор олон нийтийн байгууллага, үйлчилгээ үзүүлдэг. Халдвараас урьдчилан сэргийлэх, ариутгах баталгаажуулалтын үйлчилгээ үзүүлдэг худалдааны байгууллага болох Advanced Sterilization Products (ASP, Johnson & Johnson)-д судалгаа хийхээс өмнө багаж хэрэгслийг ариутгаж, шалгаж үзсэн.
Багаж хэрэгслийг дахин боловсруулах.(a) Ариутгал бүрийн дараа дурангийн дурангуудыг STERRAD боловсруулах процессыг ашиглан тавиуруудад хийнэ.(б) SMF болон утаснууд нь дахин боловсруулалт хийхээс өмнө хаагдсан шилэн кабелиар болон цахилгаан холбогчоор холбогддог.
Дурангуудыг дараах байдлаар цэвэрлэнэ: (1) проксималаас дистал хүртэл ферментийн цэвэрлэгчээр дэвтээсэн хөвөнгүй даавуугаар дуранг арчина;(2) Багажийг ферментийн угаалгын нунтагт 3 минутын турш усаар дүрнэ.хөвөнгүй даавуу.Цахилгаан болон шилэн кабелийн холбогчийг таглаж, уусмалаас зайлуулна;(3) Дуранг ороож, STERRAD 100NX устөрөгчийн хэт ислийн хийн плазмыг ашиглан ариутгах зорилгоор багажны тавиурт хийнэ.харьцангуй бага температур, чийгшил багатай орчин.
Одоогийн судалгаанд ашигласан ба/эсвэл дүн шинжилгээ хийсэн мэдээллийн багцыг зохих хүсэлтийн дагуу холбогдох зохиогчоос авах боломжтой.
Pilonis, ND, Januszewicz, W. & di Pietro, M. Ходоод гэдэсний дурангийн дуран дахь конфокаль лазер эндомикроскопи: Техникийн тал ба эмнэлзүйн хэрэглээ. Pilonis, ND, Januszewicz, W. & di Pietro, M. Ходоод гэдэсний дурангийн дуран дахь конфокаль лазер эндомикроскопи: Техникийн тал ба эмнэлзүйн хэрэглээ.Pilonis, ND, Januszewicz, V. i di Pietro, M. Ходоод гэдэсний дурангийн дуран дахь конфокаль лазер эндомикроскопи: техникийн тал ба эмнэлзүйн хэрэглээ. Pilonis, ND, Januszewicz, W. & di Pietro, M. 胃肠内窥镜检查中的共聚焦激光内窥镜检查：技术方面。 Pilonis, ND, Januszewicz, W. & di Pietro, M. 共载肠分别在在在共公司设计在在机机：Техникийн тал ба эмнэлзүйн хэрэглээ.Pilonis, ND, Januszewicz, V. i di Pietro, M. Ходоод гэдэсний дурангийн дуран дахь конфокал лазер дуран: техникийн тал ба эмнэлзүйн хэрэглээ.ходоод гэдэсний замын гепариныг орчуулах.7, 7 (2022).
Аль-Мансур, MR et al.SAGES TAVAC Confocal Laser Endomicroscopy-ийн аюулгүй байдал, үр дүнтэй байдлын шинжилгээ.Үйл ажиллагаа.Дурангийн дурангийн 35, 2091–2103 (2021).
Fugazza, A. et al.Ходоод гэдэс ба нойр булчирхайн цөсний замын өвчинд төвлөрсөн лазер дурангийн шинжилгээ: системчилсэн тойм, мета-шинжилгээ.Биоанагаахын шинжлэх ухаан.хадгалах сав.дотоод 2016, 4638683 (2016).